本報訊 近日,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所棉花抗逆鑒定課題組創(chuàng)建了一種簡單高效的耐鹽相關(guān)內(nèi)源基因編輯突變體篩選方法,應(yīng)用CRISPR/Cas9系統(tǒng)精確有效地編輯棉花的兩個耐鹽相關(guān)的內(nèi)源基因,為棉花的基因功能研究和分子育種提供了新思路。相關(guān)論文在線發(fā)表于《科學(xué)通報》。
CRISPR/Cas9來自微生物的免疫系統(tǒng),其利用一種Cas9酶,把一段作為引導(dǎo)工具的小RNA識別靶標(biāo)DNA位點,就能在此處對DNA進(jìn)行切斷或做其他改變。以往研究表明,CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以在多種植物中對靶標(biāo)基因進(jìn)行高效編輯。作為異源四倍體棉花的陸地棉基因組大而復(fù)雜,獲得目標(biāo)基因突變體的難度非常大,耐鹽性的研究是世界性難題,而CRISPR/Cas9系統(tǒng)為獲得棉花耐鹽突變體提供了非常好的思路。
科研人員研究發(fā)現(xiàn),對選取的棉花兩個與耐鹽相關(guān)的內(nèi)源基因GhCLA1和GhVP, CRISPR/Cas9在棉花的原生質(zhì)體中表達(dá)后,兩個基因靶標(biāo)位點的突變大部分是堿基的替換,而在轉(zhuǎn)基因棉花植株中,該系統(tǒng)造成的靶標(biāo)位點突變大部分是堿基的缺失。研究還發(fā)現(xiàn),CRISPR/Cas9系統(tǒng)在棉花細(xì)胞中具有目標(biāo)特異性,即只瞄準(zhǔn)那些為它們設(shè)定的目標(biāo)基因?;诿藁ɑ蚪M大而復(fù)雜的特點,該研究表明利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)成功創(chuàng)建了一種對棉花內(nèi)源基因編輯和篩選突變體的有效方法。
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[中國科學(xué)報]棉花所創(chuàng)建簡單高效棉花內(nèi)源基因編輯篩選方法
發(fā)布時間:2017-05-11
|來源: 《中國科學(xué)報》2017年05月10日|作者:張晴丹 馮文娟
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